「二、三百年之後人類的生活將會是難以想像般的美麗和驚人。假如這樣的生活現在還未出現，我們便應該期望著它夢想著它，為它作好準備⋯⋯」
 
《三姊妹》講述三個姊妹：奧爾加、瑪莎和伊里娜・普羅佐羅夫的故事。她們和哥哥生活在俄羅斯一偏遠小鎮的一所大房子裡。與他們受過教育和具文化的家庭相比，這個城鎮顯得有點落後和無聊，所以這個家庭不太喜歡這城鎮，自從十一年前軍人父親從莫斯科搬到這裡，姊妹們一直希望回到從前的城市生活。
 
可惜事與願違，最年長的奧爾加是一位老師，最終成為了一位校長。二姊姊瑪莎嫁給了一位自己鄙視的丈夫，卻愛上了軍官威爾什寧。最年輕的伊里娜對工作的價值有著熱衷的期盼，但當她終於接受命運，決定嫁給一直追求她的軍官屠森巴克之時，他卻在一場決鬥中死於友伴索烈奧尼的手上。哥哥安德烈追求小鎮女孩娜坦莎，他們結婚，生孩子，娜坦莎一點一點地接管家園。戲結束時，普羅佐羅夫家族幾乎全被娜坦莎趕出自己的房子。三個姊妹都只能留在那鄉鎮生活，莫斯科已經遙不可及。
 
故事發生在1917年布爾什維克革命之前的十年，契訶夫作為俄國近代最偉大的作家之一，似乎他在當時已經感受到即將來臨的一場風暴。